TÉCNICA CROMATOGRÁFICA

Técnicas cromatográficas - Procedimentos para realização. Parte I.

Cromatografia em Camada Delgada

Consiste na separação dos componentes de uma mistura através da migração diferencial sobre uma camada delgada de adsorvente retido sobre uma superfície plana.

Aplicações:

Estudos preliminares da complexidade dos componentes de um extrato orgânico;

Investigação de: Casos de envenenamento; ingestão de estimulantes por atletas;

Estudos de reações : presença  de intermediários estáveis;

Análise da pureza de compostos;

Análise da eficiência de: destilação e cristalização.

Vantagens da Cromatografia em Camada Delgada

a. Simplicidade;

b. Baixo custo;

c. Facilidade de remover por raspagem a camada, com  espátula fina ou com uma lâmina  para microscopia, para recuperar, por eluição, o conteúdo de uma mancha ou de uma banda;

ADSORVENTES UTILIZADOS EM CCD

Processo de separação varia em função da quantidade de água presente no adsorvente:

Ausência de água = Adsorção

Presença de água = Partição

Exemplos de adsorventes

Sílica-Gel ou àcido Silícico;

Óxido de alumínio ou alumina;

Celulose;

Kieselgur;

Poliamida;

Sílica gel.

Técnica Geral

Ø  Escolha da fase estacionária;

Ø  Preparação das placas cromatográficas;

Ø  Ativação das placas cromatográficas;

Ø  Seleção da fase móvel;

Ø  Aplicação das amostras nas cromatoplacas;

Ø  Preparação da cuba cromatográfica

Ø  e desenvolvimento do cromatograma;

Ø  Revelação dos cromatogramas;

Ø  Documentação;

Ø  Calculo do fator de retenção Rf;

Escolha da fase estacionária

Ø  Liofilicidade e liofobicidade

Interação com os componentes (polaridade)

Ø  Necessidade de aditivos

Aglutinantes

Substâncias fluorescentes

Ø  Capacidade adsorvedora

Preparação da placas

As placas devem ser:

Resistentes, inertes aos reagentes e solventes, resistentes à temperatura e uniformes.

Dificuldades:

Obtenção de camada uniforme.

Placas pré fabricadas:

Dispensam a fase de preparação; são mais uniformes e homogêneas, melhorando a separação e tornando os valores de Rf mais reprodutíveis.

 Procedimentos para a preparação das placas

Limpeza da placa de vidro→ detergente e água corrente (eliminação de gordura);

Secagem→em estufa

Preparação das camadas finas dos adsorventes:

Utilização de espalhadores ( mais empregada);

Submersão, aspersão ou vertendo-se sobre as placas suspensão do adsorvente apropriado.

Riscar as placas, determinando a altura de ínicio e fim da cromatografia.

 Postado por: Renata Barbosa Rodrigues

Fonte:http://cempeqc.iq.unesp.br/Jose_Eduardo/Semin%C3%A1rios%202010/Apresenta%C3%A7%C3%A3o%20cromatografia%20camada%20delgadaI_LIC2009.pdf